Украинский журнал хирургии 2 (11) 2011

Как известно, при ранениях органов живота преобладают повреждения паренхиматозных органов, а самая высокая летальность наблюдается при травмах полых органов вследствие развившегося перитонита [4–6, 8]. У больных с разлитым перитонитом, с угрозоопасными и критическими состояниями не всегда удается добиться хороших результатов лечения даже при соблюдении всех требований хирургического и анестезиологического пособия. У части пострадавших формируются метаболические нарушения вследствие необратимых изменений в каком-либо звене иммунореактивности [1]. У некоторых пациентов с закрытыми травмами живота имеют место сложности диагностики в локализации повреждений вследствие наличия сочетанных ранений и исходного нарушения общей резистентности и иммунитета организма [2]. Нарушения иммунореактивности могут протекать либо как полная анергия в гуморальном и клеточном звене иммунитета, либо как гиперреактивность, затрагивающая гуморальное звено и увеличение концентрации провоспалительных цитокинов и наличие аутоиммунных антител [3]. Учитывая неуклонный рост травматизма и тяжелое состояние больных при поступлении, обусловленное тяжелым травматическим или гемморагическим шоком, или из-за несвоевременного обращения больного за медицинской помощью, необходимо выявить специфические иммунофизиологические маркеры для классификации общей резистентности пациентов с целью разработки индивидуальных алгоритмов ведения больных с травмами [7].

Целью данного исследования была оценка типов иммунореактивности у больных с травматическим повреждением органов пищеварения с учетом возраста для разработки индивидуальных алгоритмов лечения больных с ранениями органов живота. Задачами исследования стало изучение показателей гуморального и клеточного иммунитета, оценка типов иммунореактивности и выявление возрастных особенностей иммунореактивности у больных с травматическими повреждениями органов пищеварения.

Материал и методы

Обследовано 11 больных в возрасте от 24 до 81 года. Изучали показатели гуморального иммунитета и соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов и изменения профиля провоспалительных цитокинов. Содержание ЦИК в сыворотке крови оценивали методом спектрофотометрии. Концентрацию иммуноглобулинов А, М, G определяли методом турбодиметрии с использованием моноспецифических сывороток. Соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов с кластерами дифференцировки CD 3⁺, CD 4⁺, CD8⁺, CD 11a⁺, CD 16⁺, CD 95⁺ и CD 162⁺ исследовали методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител, меченных FITC. Цитокиновый профиль оценивали по содержанию интерлейкинов ИЛ-2, ИЛ-4 и ИЛ-6 иммуноферментным методом.

Использовали новый специфичный чувствительный метод определения аутоиммунных антител на чиповых панелях с иммобилизованными субстратами различных клеток и тканей.

Метод состоит в использовании иммобилизованных на предметных стеклах чипов – мозаики из различных антигенных клеточных субстратов, которые способны взаимодействовать с компонентами сыворотки крови человека (антителами) и при этом окрашиваться флюоресцентными красителями. Скрининговый метод анализа является очень точным и специфичным, но полуколичественным методом. В случае положительного ответа на наличие специфических антител использовали подтверждающий ИФА-тест с моноспецифическими антителами либо подтверждающие тесты с использованием иммуноблотов: вестерн-блот, линейные блоты на стеклах и на нитроцеллюлозных мембранах.

Результаты и обсуждение

Полученные данные свидетельствуют о высокой вариабельности исследуемых параметров иммунореактивности у больных с травматическими повреждениями органов пищеварительного тракта в различные сроки обследования – при поступлении и через две недели после травмы.

Соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов характеризовалось количественным снижением клеток, обеспечивающих Т-клеточные реакции. Маркеры CD 95 и 162, характеризующие интенсивность апоптоза и развитие синдрома системного воспаления, были достоверно повышены. Нормальные киллерные клетки при поступлении были в средней в пределах нормы. В отдаленные сроки достоверно снижались. Средние значения концентрации интерлейкина-2 при поступлении были значительно ниже нормы. В отдаленные сроки этот показатель возрастал в 10 раз и составил в среднем 522,0 ± 48,0 пг/мл. Достоверно превышала норму во все сроки обследования концентрация ИЛ-4 и ИЛ-6 (табл. 1).

Известно, что характер иммунореактивности в значительной степени зависит от возраста пациентов и наличия сопутствующих патологических состояний, в особенности при формировании возраст-зависимой патологии. Для выяснения возможных причин формирования индивидуального иммунного ответа обследованных больных разделили на две возрастные группы. В первую группу вошли больные в возрасте от 24 до 28 лет. Во вторую группу – пациенты возрастом от 76 до 81 года.

Больные молодого возраста с травматическими повреждениями органов пищеварительного тракта имели выраженную гуморальную сенсибилизацию, что отражалось в четырехкратном увеличении сывороточной концентрации ЦИК, увеличении содержания IgA и IgG. Концентрация провоспалительного ИЛ-2 также значительно превысила контрольные значения и составила 700,5 ±  8,7 пг/мл, что в 2 раза выше референтных значений. Субпопуляции Т-лимфоцитов в ранние сроки после травмы были несколько ниже, чем в контрольной группе. У больных второй возрастной группы гиперчувствительность немедленного типа была значительно снижена по сравнению с контрольной группой и первой группой больных, которую составили пациенты молодого возраста. Иммуноглобулин А был в 8 раз ниже, чем в контрольной группе, и значительно ниже, чем у молодых. Концентрация циркулирующих иммунных комплексов была на нижней границе нормы и в 7 раз меньше, чем в группе молодых пациентов. Экспрессия маркеров дифференцировки CD на Т-лимфоцитах периферической крови была снижена относительно контрольных значений и достоверно отличалась от данных показателей в первой группе. Концентрация провоспалительного ИЛ-2 была значительно ниже контрольных значений и составила 50,4 ± 8,4 пг/мл (табл. 2).

Увеличение органоспецифических антител выявлено к ткани кишечника и печени у больных старшей возрастной группы с травматическими повреждениями органов пищеварительного тракта.

Наличие аутоиммунных реакций у больных старшего возраста ведет к угнетению гуморального и Т-клеточного иммунитета по принципу компенсаторной адаптации. У этой возрастной группы на фоне иммунодефицита в клеточном звене иммунитета с развитием аутоиммунных реакций показана энтеросорбция, применение иммунокоррегирующих препаратов и аналогов интерлейкинов и интерфероногены. Для молодых на фоне гиперэргического типа иммунного ответа противопоказано применение препаратов тимуса, интерфероногенов и ронколейкина, так как на фоне преобладания катаболических реакций эти препараты могут приводить к усилению реакций опсонизации и быстрому развитию сывороточной болезни и анафилаксии.

Выводы

1. У больных с травматическими повреждениями органов пищеварительного тракта выявлен выраженный дисбаланс иммунологической резистентности.

2. У пациентов молодого возраста с травматическими повреждениями органов пищеварительного тракта превалирует гиперреактивность гуморального и клеточного звеньев иммунитета.